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      PCR八聯管試劑盒的清洗方法及注意實現

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      PCR八聯管試劑盒的清洗方法及注意實現

      發布日期:2020-10-13 14:21 來源:http://www.techguysusa.com 點擊:

      我們在使用后PCR八聯管試劑盒需要清洗的。有一些方法可以清潔PCR八聯管試劑盒。使用時應注意什么?

      實驗方法原理:硅膠膜在高鹽條件下與DNA結合,在低鹽條件下與DNA分離。在含有DNA的清洗溶液中分離出引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等,因為它們與DNA沒有相似的性質。

      實驗材料:PCR產物,試劑,試劑盒,PCR清潔套件,儀器,消耗品,96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V形板

      一、PCR八聯管廠家談試劑盒的組成,儲存,穩定性

      1、說明書,消耗品:96孔DNA制備板,96孔1.6ml深孔板,96孔V形板。

      2、緩沖液PCR-A:DNA結合溶液。在室溫下以密封狀態儲存。如果發生沉淀,應將其溶解在65°C的溫浴中,并在使用前冷卻至室溫。

      3、緩沖液W2濃縮液:除去鹽溶液。使用前,根據瓶子上指定的體積加入乙醇,充分混合,并在室溫下保存??梢允褂?00%乙醇或95%無水乙醇。

      4.洗脫液:2.5mM Tris-HCl,pH 8.5,在室溫下以密封狀態儲存。

      二、PCR八聯管廠家談操作步驟

      用戶可以選擇負壓或離心。

      一次性針頭過濾器,一次性針頭過濾器廠家,南通針頭濾器

      A.負壓法

      1、正確連接負壓裝置,將96孔DNA制備板放在負壓裝置上;在PCR,酶消化,酶標記或測序反應溶液中加入3倍緩沖液PCR-A(如果緩沖液PCR-A小于100μl,加入100μl);充分混合并轉移至96孔DNA制備板,打開并調節負壓至-25-30英寸汞柱,并緩慢吸出板中的溶液。

      2、加入0.3 ml緩沖液W2并吸收溶液。用相同的方法用0.3ml緩沖液W2洗滌兩次。

      確認在試劑瓶上的指定體積的緩沖液W2濃縮物中加入無水乙醇。

      3、維持負壓并提取96孔DNA制備板10分鐘。

      4、在長纖維組織上將96孔DNA制備板粉碎6次,引流管朝下。

      5、將96孔DNA制備板置于96孔V形板上,加入25-30ul水或洗脫至膜中心,在室溫下靜置1分鐘。通過以3 000×g離心5分鐘洗脫DNA。

      B.離心

      1、在PCR,消化,酶標記或測序反應中加入3倍體積的Buffer PCR-A(如果Buffer PCR-A小于100μl,加100μl);混合并轉移到制備板96孔中的96孔DNA中。將DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中,以1000×g離心1分鐘,棄去濾液。

      2、在96孔DNA制備板中,加入0.3ml緩沖液W2,以1000×g離心1分鐘,棄去濾液。用0.3ml緩沖液W2以相同方式再次洗滌。確認在試劑瓶上的指定體積的緩沖液W2濃縮物中加入無水乙醇。

      3、將96孔DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中,并以3 000×g離心10分鐘。

      4、將96孔DNA制備板置于干凈的96孔V形底板中,加入25-30ul水或洗脫至膜中心,在室溫下靜置1分鐘。通過以3 000×g離心5分鐘洗脫DNA。

      PCR八聯管廠家談注意事項:

      1、將洗脫液或水加熱至65°C有助于提高洗脫效率。

      2、DNA分子是酸性的,建議儲存在2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5洗脫液中。

      相關標簽:針頭濾器

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